Меры предосторожности при использовании системы анализа изображений геля

С постепенной популяризацией исследований в области молекулярной биологии спрос на системы гелевой визуализации в Китае растет. Независимо от назначения компоненты системы гелевой визуализации аналогичны и состоят из системы съемки, темного ящика со специальным источником света и программного обеспечения для получения и анализа гелевых изображений.

1. Что такое система анализа изображений геля?

Визуализация геля — это нехемилюминесцентное обнаружение изображений и анализ различных окрашиваний гель-электрофореза, таких как ДНК/РНК/белки (например, EB, Coomassie Brilliant Blue, Silver Staining, SYBR Green), а также микропланшетов, плоских блюд и т. д. Система визуализации геля может использоваться для рутинных биоинженерных исследований, таких как расчет молекулярной массы, сканирование плотности, количественная оценка плотности, количественная оценка ПЦР и т. д.

2. Классификация системы анализа изображений геля.
Общая система анализа изображений геля
Может собирать изображения геля электрофореза белков и образцов геля ДНК и выполнять качественный и количественный анализ. Образцы включают: мониторинг нуклеиновых кислот, окрашенных EB, SYBRGreen, SYBRGold, TexasRed, GelStar, Fluoroscecin, RadiantRed и т. д.; и белковые гели, окрашенные CoomassieBlue, SYPROOrange, различными красителями, такими как коровий краситель и т. д. (или УФ, ЭБ и цветное и видимое изображение образцов).

Система анализа хемилюминесцентных изображений
Система гелевой визуализации обеспечивает УФ-, ЭЛ-, хемилюминесцентную, ультрафиолетово-флуоресцентную, цветную и видимую визуализацию образцов.

Система анализа многоцветной флуоресцентной визуализации
Диапазон визуализации охватывает УФ, ЭБ, хемилюминесценцию, многоцветную флуоресценцию, цветную и видимую визуализацию образцов.

Многофункциональная система визуализации in vivo УФ, ЭБ, хемилюминесценция, многоцветная флуоресценция, цветная и видимая визуализация образцов, а также тканей in vitro и мелких животных, и крупных животных.

3. Принцип системы анализа изображений геля.
Скорость миграции образцов на геле для электрофореза или других носителях различна. Сравнивая стандартные или другие альтернативные стандартные продукты, можно провести качественный анализ неизвестных образцов. Это основа качественного анализа системы анализа изображений. По положению неизвестных образцов в спектре их можно провести качественный анализ для определения их состава и свойств.

Образец частично поглощает проецируемый или отраженный свет, поэтому оптическая плотность полосы образца на изображении, полученном фотографией, будет разной. Оптическая плотность линейно связана с концентрацией или массой образца. По оптической плотности неизвестного образца концентрацию или массу неизвестного образца можно получить путем сравнения его с показателем оптической плотности полосы образца известной концентрации. Это основа количественного анализа системы анализа изображений. Новейший источник света с пропусканием ультрафиолета и источник света с передачей белого света делают распределение света более равномерным и минимизируют влияние неравномерной оптической плотности на результаты.

4. Область применения системы гелевой визуализации.
В целом, гель-визуализация может применяться к: Система гель-визуализации может использоваться для качественного анализа результатов разделения и очистки белков, нуклеиновых кислот, пептидов, аминокислот, полиаминокислот и других биологических молекул.
Количественное определение молекулярной массы
Для обычно используемых пленок ДНК функция количественного определения молекулярной массы используется для автоматического создания аппроксимационной кривой путем аннотации известной молекулярной массы полосы маркера ДНК на геле и использования ее для измерения молекулярной массы неизвестной полосы. Результаты, полученные этим методом, гораздо точнее, чем наблюдение невооруженным глазом.

Количественное определение плотности
Обычно используемым методом определения концентрации ДНК (дезоксирибонуклеиновой кислоты) и РНК (рибонуклеиновой кислоты) является метод ультрафиолетового поглощения, но он позволяет определить только общую концентрацию нуклеотидов в образце, но не позволяет различить концентрацию фрагмента каждой длины. Используя систему визуализации геля и программное обеспечение, после калибровки плотности стандартной полосы с известным содержанием ДНК на пленке ДНК вы можете легко щелкнуть другие неизвестные полосы и сравнить их с плотностью известных полос, чтобы получить неизвестное содержание ДНК. . Этот метод также подходит для определения концентрации полос белкового геля PAGE.

Сканирование плотности
В молекулярной биологии и биоинженерных исследованиях наиболее часто используемым методом является расчет процентного содержания продуктов экспрессии белка во всем бактериальном белке. Традиционный метод заключается в использовании специального сканирования плотности, но эту работу можно выполнить с помощью программного обеспечения для биологического анализа в сочетании со сканером, обычно оборудованным в лаборатории, или непосредственно с использованием белого света для облучения изображения геля.

ПЦР-количественное определение
Количественное определение ПЦР главным образом означает, что если полоса, амплифицированная в ходе эксперимента ПЦР, не одна, то программное обеспечение можно использовать для расчета относительного процента каждой полосы в общей полосе. С точки зрения этой функции она аналогична сканированию плотности, но фактический принцип другой. Количественная оценка ПЦР заключается в количественном определении относительной плотности выбранных полос и расчете их процента от общего количества. Во время сканирования плотности для выбранной области генерируется и интегрируется график кривой продольного сканирования.

5. Обслуживание системы гелевой визуализации.
Цикл обслуживания гель-имиджера обычно составляет около двух недель. Инструмент необходимо содержать в чистоте, а периферию поверхности – чистой; Включите прибор и программное обеспечение, проверьте, находится ли кабель передачи данных программного обеспечения в нормальном контакте, и функция работы программного обеспечения не повреждена.

Компьютерный альбом инструментов должен быть выделен во избежание заражения компьютерными вирусами, которые сделают его непригодным для использования. При этом переустанавливать систему запрещено, поскольку после переустановки программное обеспечение прибора необходимо повторно активировать, прежде чем его можно будет использовать.

Для закрытия темного ящика следует использовать правильный метод закрытия. Конкретный процесс заключается в том, чтобы закрыть дверь темного ящика под углом около 60 градусов, отпустить ее и полагаться на силу тяжести, чтобы закрыть дверь самостоятельно. Следует отметить, что запрещается сильно толкать дверцу темного ящика, чтобы закрыть ее.

Во время обычного использования и технического обслуживания следите за чистотой блока УФ-света и панели проекционного белого света, чтобы не повлиять на эффект гелевой визуализации гелевого имидж-сканера.

В процессе эксплуатации гель-визионера, помимо правильного использования прибора, необходимо также строго соблюдать лабораторный регламент. Система визуализации геля может выполнять качественный анализ результатов разделения и очистки других биологических молекул, таких как белки, нуклеиновые кислоты, пептиды, аминокислоты и полиаминокислоты.

6. Меры предосторожности при использовании системы гель-визуализации
Сначала включите систему визуализации геля, затем включите компьютер и войдите в программное обеспечение.
При съемке фотографий с использованием ультрафиолетового геля не допускайте загрязнения прибора ЭБ и не прикасайтесь к дверце системы формирования гелевых изображений загрязненными перчатками.
В процессе фотосъемки с использованием источников ультрафиолетового света нельзя открывать переднюю панель системы гелевой визуализации.
После съемки удалите остатки клея и протрите их более мягкой бумагой.
Будьте осторожны при фокусировке и не двигайтесь резко.
Пожалуйста, используйте стабилизированный источник питания.
Следите за тем, чтобы помещение было сухим, и своевременно вытирайте воду или другие жидкости, оставшиеся на смотровой площадке.
При использовании прибора плотно закрывайте дверь и смотровую площадку, иначе ультрафиолетовую лампу невозможно будет нормально использовать.
Постарайтесь не подключать компьютер к Интернету или локальной сети и установите на компьютер антивирусное программное обеспечение, чтобы гарантировать, что компьютер предназначен для конкретного использования.
Если инструмент не используется в течение длительного времени, накройте его пылезащитным чехлом.
Чтобы продлить срок службы лампы, своевременно выключайте источник света после наблюдения за гелем.

Система анализа изображений геля является незаменимым инструментом в молекулярно-биологических исследованиях и клинической диагностике. Он предоставляет ученым и врачам мощные диагностические и исследовательские инструменты посредством высокоточной визуализации и передового программного анализа, которые помогают понимать и лечить различные заболевания. Благодаря постоянному развитию технологий производительность и диапазон применения системы анализа гелевых изображений будут продолжать расширяться, внося больший вклад в развитие наук о жизни.